熒光體視顯微鏡的構(gòu)造及性能作用
發(fā)布人：發(fā)布時(shí)間：2014/9/10
熒光體視顯微鏡就其構(gòu)造來(lái)說(shuō)，同一般顯微鏡相比具有許多特點(diǎn)，下面按部件分別加以敘述。
1.照明器
在熒先體視顯微鏡中，光在一系列濾光片上的損失是相當(dāng)大的，只有很少的激光發(fā)光最終交為熒光。在大多數(shù)情況下熒光的最終產(chǎn)量只占光源發(fā)射光量的0.1%或者更低，因此熒光顯微鏡必須具有很強(qiáng)的光源。所有的白熾燈在光譜的藍(lán)紫范圍內(nèi)只有很少的光產(chǎn)量，而這個(gè)范圍正是大多數(shù)熒光染料故激發(fā)的區(qū)域，因此自熾燈不適用于熒光體視顯微鏡，現(xiàn)在在熒光顯微鏡中經(jīng)常使用100W和20OW的離壓汞燈成高壓氙燈，它們?cè)诮贤夂涂梢姽獾乃{(lán)紫范圍內(nèi)有較強(qiáng)的發(fā)射，高壓汞燈在光譜的365.404,436,546,577nm波長(zhǎng)有發(fā)射峰，高壓氙燈在紫外和可見光范圍內(nèi)有連續(xù)發(fā)射光譜，盡管這兩種氣體放電燈需要復(fù)雜的附屬設(shè)備，并且壽命較短、價(jià)格昂貴，但是它們?cè)跓晒怏w視顯微鏡中已經(jīng)占有不可替代的位置。
超高壓汞燈(或氙燈)的燈飽用對(duì)紫外光有很好通透性的石英玻璃制作。中間呈球形，內(nèi)充一定數(shù)量的汞(氙燈)。工作時(shí)兩個(gè)電板間放電，引起汞(或氙)蒸發(fā)，燈內(nèi)氣壓迅速上升，可達(dá)50-70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓，燈的亮度可達(dá)2萬(wàn)熙提。
由于這種氣體放電燈放出大量的熱量，因此燈室必須有良好的散熱條件，工作室溫度也不宜太高。這種燈啟動(dòng)一次。工作時(shí)間越短，燈的壽命則越短，一般啟動(dòng)后至少20分鐘才能關(guān)閉，注意盡量減少啟動(dòng)次數(shù)。另外由于工作時(shí)燈內(nèi)壓力很離，紫外線強(qiáng)烈。因此燈必須置于堅(jiān)固的燈室之內(nèi)，以免傷害人的眼睛，另外在萬(wàn)一暴躁時(shí)不致傷人。
2.集光器
在熒光體視顯微鏡中，原來(lái)住用的是一般的明視野集光器。為了在觀察時(shí)能把最大強(qiáng)度的光聚集在標(biāo)本上，通常集光器的孔徑應(yīng)盡可能的大。由于物體的熒光在理論上可以被當(dāng)作自發(fā)光體，因此集光器像的質(zhì)量在熒光體視顯微鏡中實(shí)際上是不重要的，一個(gè)簡(jiǎn)單的阿貝氏集光器就可以得到良好的效果。當(dāng)用油浸系觀察時(shí)，一般使用數(shù)值孔徑在1.0以上的集光器，同時(shí)還必須使用對(duì)紫外光吸收很少的特制無(wú)熒光浸油，并且使用使用集光器浸潤(rùn)。此外，這種浸潤(rùn)還可以使用重蒸水或無(wú)熒光甘油。
目前暗視野集光器在熒光體視顯微鏡中的應(yīng)用日益廣泛，并有取代明視野集光盡的趨勢(shì)。達(dá)足因?yàn)槭褂冒狄曇凹馄鲿r(shí)，激發(fā)光不能直接進(jìn)入物鏡。并且除散射光外，激發(fā)光也不進(jìn)入目鏡，這就使得激發(fā)濾片可以大大減薄，從而顯著增大激發(fā)光的強(qiáng)度。而且阻斷濾片也可以很薄，這就增強(qiáng)了熒光圖像的亮度和反差，提高了像的質(zhì)量，觀察也比較方便。
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